Образован в 1953 году




НазваниеОбразован в 1953 году
страница4/6
Дата публикации02.09.2013
Размер0.65 Mb.
ТипЛабораторная работа
zadocs.ru > География > Лабораторная работа
1   2   3   4   5   6
^
Подготовка к испытанию:
Приготовление растворов

Растворы для осаждения белков

1. Раствор гексацианоферрата калия: 106 г гексацианоферрата калия растворяют в воде и доводят объем раствора до 1 000 см3 водой.

2. Раствор уксуснокислого цинка: 220 г уксуснокислого цинка растворяют в смеси воды и 30 см3 ледяной уксусной кислоты и доводят объем раствора до 1000 см3.

3. Раствор сернокислого цинка: 535 г сернокислого цинка растворяют в воде и доводят объем раствора до 1 000 см3 водой.

4. Раствор натрия тетраборнокислого: 50 г натрия тетраборнокислого растворяют в 1000 см3 теплой дистиллированной воды температуры 50±2° С и охлаждают до температуры 20±2° С. Объем доводят до метки дистиллированной водой.

5. Раствор соляной кислоты 2,0 моль/дм3: 160 см3 соляной кислоты (плотностью 1,19 г/см3) растворяют в мерной колбе вместимостью 1 дм3 в дистиллированной воде и доводят объем до метки.

6. Раствор соляной кислоты 0,1 моль/дм3: 50 см3 раствора соляной кислоты (п.5.) растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 1 дм3 и доводят объем до метки.

7. Раствор гидроксида натрия: 30 г гидроксида натрия растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки 100 см3.

8. Буферный раствор рН 9,6-9,7: в мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят около 600 см3 воды, 50 см3 концентрированной соляной кислоты, 10 г трилона Б, встряхивают и добавляют 135 см3 аммиака водного (плотностью 0,88 г/см3). Перемешивают, проверяют рН потенциометрически и доводят при необходимости до рН 9,6-9,7. Объем раствора доводят дистиллированной водой до метки.

9. Раствор сульфата кадмия: 100 г сульфата или хлорида кадмия растворяют в воде и доводят объем раствора до 1000 см3 водой.

10. Раствор меди сернокислой: 20 г меди сернокислой растворяют в воде и доводят объем раствора до 1000 см3 водой.

11. Раствор трилона Б: 33,5 г динатриевой соли Этилендиаминтетрауксусной кислоты растворяют в воде и доводят раствор до 1000 см3 водой.

12. Раствор для обработки кадмиевой колонки: смешивают 50 см3 раствора трилона Б, 20 см3 раствора соляной кислоты (п.6.) и доводят раствор до 1000см3.

Стандартные растворы нитрата калия

1. Основной раствор, содержащий 1 мг МОз/см3: 1,6300 г калия азотнокислого, перекристаллизованного из воды и высушенного до постоянной массы при 105-110° С, вносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, растворяют в воде и доводят объем до метки водой. Раствор хранят в холодильнике до 6 мес.

2. Рабочий раствор, содержащий 10 мкг КОз/см3: пипеткой вносят 10 см3 основного стандартного раствора в мерную колбу на 1000 см3, добавляют 20 см3 буфера (п.8.) и доводят объем до метки водой.

Раствор используют в день проведения анализа.

^ Стандартные растворы нитрита натрия

1. Основной раствор, содержащий 0,2 мг NO2/cm3: 0,1500 г нитрта натрия, перекристаллизованного из воды и высушенного до: постоянной массы при 105-110° С, вносят в мерную колбу вместимостью 500 см3 доводят объем раствора до метки водой.

Раствор хранят в холодильнике не более недели.

2. Рабочий раствор, содержащий 2 мкг NO2/см3: пипеткой вносят 10 см3 основного раствора в мерную колбу на 1000 см3, добавляют 20 см3 буфера (п.8.) и доводят объем до метки водой.

Раствор используют в день проведения анализа.

^ Растворы для проведения цветной реакции

а) Раствор сульфаниламида: в мерную колбу на 100 см3 помещают 0,5 г сульфаниламида, добавляют 75 см3 дистиллированной воды и 5 см3 концентрированной соляной кислоты. Смесь выдерживают на кипящей водяной бане до полного растворения сульфаниламида, затем раствор охлаждают и доводят до метки водой. Если необходимо, фильтруют.

б) Раствор N-(1-нафтил)-этилендиамина дигидрохлорида (НЭДА): 0,1 г НЭДА растворяют в мерной колбе вместимостью 50 см3 в дистиллированной воде и доводят объем раствора до метки. Растворы, приготовленные по пп. а) и б) хранят в холодильнике в склянке из темного стекла с притертой пробкой не более 1 мес.

в) Раствор сульфаниловой кислоты: 1,5 г сульфаниловой кислоты растворяют в 200 см3 горячей воды (дистиллированной) и после охлаждения добавляют 50 см3 ледяной уксусной кислоты.

г) Раствор 1-нафтиламина: 1,2 г 1-нафтиламина растворяют в 50 см3 ледяной уксусной кислоты и доводят объем раствора дистиллированной водой до 200 см3. Приготовленные по пп. в) и г) растворы хранят в холодильнике в склянке из темного стекла с притертой пробкой не более 1 мес.

д) Раствор соляной кислоты: 450 см3 соляной кислоты (плотностью 1,19 г/см3) растворяют в мерной колбе вместимостью 1 дм3 в дистиллированной воде и доводят до метки.
Приготовление пористого кадмия

Гранулы цинка (250-300 шт.) распределяют по дну кристаллизатора (лучше использовать цинковые пластинки или палочки) и заливают 1000 см3 раствора сернокислого кадмия (1.5.1.6.). Через 24 ч остаток цинка отделяют от кадмия водой декантацией 2-3 раза.

Образовавшийся пористый кадмий с помощью 0,1 М раствора HCl переносят в гомогенизатор и измельчают до получения частиц размером 0,3-0,8 мм. Измельченный кадмий переносят в коническую колбу вместимостью 250 см3 0,1 М раствором соляной кислоты (1.5.1.3), промывают и оставляют под этим раствором 12 ч, затем декантацией промывают кадмий дистиллированной водой до исчезновения хлоридов (до отрицательной реакции с 1% раствором нитрата серебра). Добавляют 150-200 см3 раствора сульфата меди (1.5.1.7), вращательными движениями колбы перемешивают содержимое в течение 1 мин. Декантируют раствор сульфата меди и промывают водой несколько раз, отделяя при этом мелкую фракцию кадмия и следя за тем, чтобы он все время был покрыт водой.

^ Подготовка кадмиевой колонки

Собирают систему согласно рис.1. На дно стеклянной колонки помещают тонкий слой стеклянной ваты, колонку заполняют водой и вносят суспензию кадмия фарфоровой ложечкой на высоту 15-20 см. При заполнении колонки дают воде периодически стекать, чтобы уровень воды не опускался ниже поверхности слоя кадмия. Слой кадмия все время периодически перемешивают стеклянной палочкой, чтобы в колонке не осталось пузырьков газа.



Рис. 1. Кадмиевая колонка.

1 – резервуар; 2 – стеклянная колонка; 3 – кран (или зажим); 4 – стеклянная трубка; 5 – слой кадмия; 6 – стеклянная вата; 7 – носик.
Колонку, заполненную свежеприготовленным омедненным пористым кадмием, обрабатывают следующим образом: пропускают через слой кадмия смесь, состоящую из 750 см3 воды, 225 см3 рабочего раствора нитрата калия (1.5.1.10.2), 20 см3 буферного раствора (1.5.1.5) и 20 см3 раствора трилона Б (1.5.1.8) со скоростью 6 см3/мин, после чего промывают кадмиевую колонку (100 см3 воды) до полного удаления нитритов. Кадмий в колонке хранят под слоем воды.

Проверка восстановительной способности кадмиевой колонки

Восстановительную способность кадмиевой колонки проверяют перед началом работы и в конце анализа каждый день.

1. В резервуар колонки пипеткой вносят 20 см3 рабочего стандартного раствора нитрата калия и 5 см3 аммиачного буферного раствора. Устанавливают скорость элюирования 3-5 см3/мин и собирают элюат в мерную колбу вместимостью 100 см3. Когда резервуар опустеет, стенки его дважды смывают водой порциями по 15 см3 и пропускают воду через слой кадмия.

После того как соберут около 100 см3 элюата, удаляют колбу из-под колонки, доводят объем до метки водой и перемешивают.

2. Проводят контрольное определение, повторяя операцию как указано в п.1.5.4.1, используя вместо стандартного раствора нитрата 20 см3 воды.

3. В 2 мерные колбы вместимостью 50 см3 вносят пипеткой по 10 см3 стандартного и контрольного элюата и далее проводят определение нитритов. Если содержание NO2, определенное по градуировочному графику, меньше 0.27 мкг/см3 (90%), колонку следует регенерировать.
^ Регенерирование колонки с кадмием

Регенерацию колонки следует проводить ежедневно и если контроль колонки показывает недостаточную ее эффектность. Для этого колонку промывают последовательно 100 см3 раствора , 25 см3 раствора соляной кислоты, 50 см3 воды со скоростью 6 см3/мин. Если эффективность колонки и после этого окажется неудовлетворительной, то кадмий переносят из колонки в химический стакан, заливают на ночь водой, затем раствором соляной кислоты конецентрацией 2,0 моль/дм3 на 1 ч. Промывают 100 см3 раствора, затем дистиллированной водой, 50 см3 буферного раствора, разбавленного в 10 раз, и вновь проверяют восстановительную способность колонки.
^ Построение градуировочного графика для определения нитритов.

1. В 6 мерных колб вместимостью 100 см3 пипеткой вносят 0 (контрольный раствор) 1,0; 5,0; 10,0; 20,0; 40,0 см3 стандартного рабочего раствора нитрита, что соответствует 0; 0,02; 0,1; 0,2; 0,4; 0,8 мкг нитрита (NO2) в 1 см3 раствора.

Для получения окраски используют НЭДА и сульфаниламид, либо 1-нафтиламин и сулфаниловую кислоту.

2. При проведении реакции с НЭДА и сульфаниламидом и по 2 см3 раствора соляной кислоты, перемешивают и оставляют в темноте на 3 мин. Затем добавляют по 2 см3 раствора НЭДА, доводят объем до метки дистиллированной водой, перемешивают и оставляют в темноте на 10 мин.

Измеряют оптическую плотность растворов на спектрофотометре при длине волны 538 нм или фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром в кюветах с длиной оптического пути 10-40 мм. Контролем служит раствор, не содержащий нитритов. Измерение следует провести в течение получаса со времени выдержки.

3. В случае использования сульфаниловой кислоты и 1-нафтиламина в колбы добавляют по 2 см3 раствора сульфаниловой кислоты, 6 см3 раствора соляной кислоты, перемешивают и оставляют в темноте на 5 мин при комнатной температуре. Затем добавляют по 2 см3 раствора 1-нафтиламина, перемешивают, доводят дистиллированной водой до метки и выдерживают в темноте 1 ч. Измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 522 нм или на фотоэлектроколориметре с зеленым фильтром, в кюветах с длиной оптического пути 10-40 мм. Контролем служит раствор, не содержащий нитратов. Измерение следует провести в течение получаса со времени выдержки.

4. По полученным средним данным из двух параллельных определений строят градуировочный график. На оси абсцисс откладывают содержание нитритов (NO2) в мкг на 1 см3 измеряемого раствора (0,02; 0,1; 0,2; 0,4; 0,8 мкг/см3), на оси ординат – соответствующие значения оптической плотности.
^ Проведение испытания

Подготовка проб для испытания

1. Пробы растительной продукции к испытанию готовят следующим образом.

Пробы растениеводческой продукции, отобранной по п.1.2, тщательно измельчают с помощью терки, мясорубки или гомогенизатора, перемешивают и взвешивают пробу в количестве 20 г (при низких - до 50 мг/кг - содержаниях нитратов) или 10 г (в остальных случаях). Навеску продукта помещают в 200-250 см3 коническую калиброванную колбу, добавляют 120-150 см3 теплой дисяшшированной воды (50-55° С), 5 см3 буфера(1.5.1.5) и тщательно перемешивают до однородного состояния, помещают на водяную баню (50-55° С) и выдерживают при периодическом перемешивании при этой температуре 5 мин, добавляют 5 см3 раствора натрия тетраборнокислого (1.5.1.1.4), 5 см3 раствора уксуснокислого цинка (1.5.1.1.2) или сульфата цинка (1.5.1.1.3) и 5 см3 раствора гексацианоферрата (1.5.1.1.1), перемешивают содержимое колбы после добавления каждого реагента, выдержи­вают при периодическом перемешивании на водяной бане 15-20 мин, охлаждают до комнатной температуры, объем доводят дистиллированной водой до метки и фильтруют через бумажный фильтр (фильтрат 1). Фильтрат 1 служит для определения нитратов и нитритов.

Примечание 1. При получении мутного фильтрата в качестве оса-дителей можно использовать 5 см3 раствора цинка сернокислого (1.5.1.1.3) и 5-10 см3 раствора гидроокиси натрия (1.5.1.4) или при повторении экстракции применять большее количество осаждающих реактивов и контролировать рН среды (рН должно быть выше 9,0).

Примечание 2. При анализе зерна и зернопродуктов (мука, макароны) необходимо использовать навеску образца не более 10 г. Не следует добавлять к пробе нагретые растворы осадителей белка и горячую дистиллированную воду.

2.1. Пробы животноводческой продукции готовят к испытанию следующим образом.

2.1.1. Пробы молока, жидких заменителей цельного молока, (сливок, жидких кисломолочных продуктов, пахты, сыворотки в количестве 100 см3 помещают в калиброванную коническую колбу вместимостью 250 см3, добавляют 50 см3 теплой (50-55° С) дистиллированной воды и перемешивают.

2.1.2. Пробы сыра твердого, сыра плавленого, сметаны, творога, творожных изделий, сгущенных молочных продуктов, масла сливочного, мороженого в количестве 20 г (творог, сыр предварительно измельчают с помощью устройства для измельчения проб) помещают в калиброванную коническую колбу вместимостью 200 см3, добавляют 100 см3 теплой (50-55° С) дистиллированной воды и перемешивают до однородного состояния молока, сухих молочных смесей для детского питания в количестве 10 г помещают в калиброванную коническую колбу вместимостью 200 см3, добавляют 100 см3 теплой (50-55° С) дистиллированной воды и перемешивают до однородного состояния.

2.1.3. Суспензию или эмульсию молочных продуктов в воде выдерживают на водяной бане при периодическом перемешивании 5 мин, добавляют 12 см3 раствора сульфата цинка или 12 см3 ацетата цинка, 12 см3 раствора гексацианоферрата калия, 40 см3 аммиачного буфера. Выдерживают на водяной бане 15-20 мин, периодически встряхивая колбу. Охлаждают до комнатной температуры, доводят объем дистиллированной водой до 200 см3 (до 250 см3 при анализе молока и жидких мо­лочных продуктов), перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр (фильтрат 1). Фильтрат 1 служит для определения нитратов и нитритов.

В мерную колбу на 200-250 см3 вносят 100 см3 дистиллированной воды, добавляют реактивы для осаждения в количествах, соответствующих виду продукта, выдерживают на водяной бане 15-20 мин, охлаждают до комнатной температуры, доводят объем дистиллированной водой до 200-250 см3 и фильтруют (фильтрат 2).

Примечание. Если фильтраты используемых продуктов окрашены, то в качестве контрольного раствора используется смесь, полученная по приведенной выше (п.1.6.2) прописи без добавления НЭДА (или 1-нафтиламина).

По полученному значению оптической плотности с помощью градуировочного графика находят концентрацию нитрит-иона.

^ Определение нитратов

В стаканчик или колбочку вместимостью 50 см3 вносят от 5 до 20 см3 фильтрата 1 в зависимости от предполагаемого содержания нитратов в анализируемой продукции. При ожидаемой концентрации от 0 до 300 мг/кг NO3 объем фильтрата, используемого для восстановления на колонке, составляет 20 см3, при 300-800 мг/кг NO3 -10 см3, свыше 800 мг/кг NO3 - 5 см3. К указанному раствору добавляют 5 см3 аммиачного буфера, перемешивают, пропускают через кадмиевую колонку со скоростью 5 см3/мин - сначала полученный раствор образца. Собирают элюат в мерную колбу вместимостью 100 см3. Стаканчик и резервуар дважды промывают порциями воды по 15 см3 и также пропускают через слой кадмия. Затем заполняют резервуар водой и, если ожидаемая концентрация нитратов в образце составляет от 0 до 50 мг NO3/кг, продолжают элюировать до накопления около 80 см3 элюата, затем колбу удаляют. К полученному элюату добавляют реагенты для проведения цветной реакции в соответствии с описанной выше и проводят измерение оптической плотности полученного раствора в сравнении с контрольной пробой продукта, заменив фильтрат 1 на 20 см3 фильтрата 2.

Если ожидаемая концентрация нитратов в образце более 50 мг NOs на кг, элюцшо продолжают до объема 100 см3. Для проведения цветной реакции аналогично описанной выше используют 20 см3 этого элюата (если предполагаемая концентрация нитратов не превышает 1000 мг/кг) или 5-10 см3 элюата (при концентрации нитратов в образце свыше 1000 мг/кг).

Обработка результатов:

1. Концентрацию нитритов (X), выраженную в мг/кг твердого продукта (в пересчете на нитрит-ион), вычисляют по формуле:

,

где К – коэффициент только для анализа молока и молочных продуктов, (см. табл. 43); C1 – концентрация нитритов, найденная по градуировочному графику, мкг/см3; V1 – общий объем экстракта, см3; V1 – объем колориметрируемого раствора, см3; М – масса навески образца, взятого для анализа, г; V4 – объем фильтрата 1, взятый на цветную реакцию, см3.

2. Концентрацию нитритов (X) в мг/дм3 жидких, продуктов (в расчете на нитрит-ион) вычисляют по формуле:

,
где V3 – объем образца продукта, взятый для анализа, см3; К, C1,V1,V2, V4 – по п.1.7.1.

,
3. Концентрация нитратов (Y) в мг/кг (в расчете на нитрат-ион) для твердых, продуктов вычисляют по формуле:
где K1 – коэффициент только для молока и молочных продуктов;

С2 – концентрация нитритов, найденная по градуировочному графику, мкг/см3;

V1 – общий объем экстракта, см3;

V5 – объем фильтрата, взятый для восстановления на колонку, см3;

V6 – объем элюата, полученный с колонки, см3;

V7 – объем элюата, взятый на цветную реакцию, см3;

V8 – объем колориметрируемого раствора, см3;

М – масса навески пробы продукта, взятого для анализа, г;

X – массовая концентрация нитритов по п. 1.7.1.

Таблица 7

Коэффициенты для расчета нитратов и нитритов

Продукт


К*


К**


Молоко пастеризованное


1,09


1,06


Сливки


1,05


1,07


Кефир жирный


0,95


1,05


Кефир фруктовый


1,09


1,18


Кефир с витамином С


1,13


1,14


Простокваша


1,00


1,00


Ряженка


0,87


0,99


Сметана


1,00


1,09


Творог жирный


1,00


0,93


Творожные изделия


0,83


0,93


Паста ацидофильная


1,00


1,00


Сыры v


0,96


1,05


Мороженое


1,00


0,99


Сухое молоко, смесь


1,08


1,05


Сгущенное молоко


0,99


1,05



4. Концентрацию нитратов (Y) в мг/дм3 (в расчете на нитрат-ион) вычисляют по формуле:

Y =

где V0 – объем образца продукта, взятый для анализа, см3; К, С2, V1, V5, V6,V7, V8 – по п.3.

* К – коэффициент, учитывающий влияние матрицы молочного продукта при определении нитритов.

** k коэффициент, учитывающий влияние матрицы молочного продукта при определении нитратов.
Контрольные вопросы:

1. Каково содержание нитратов в основных овощах и фруктах рациона человека?

2. Каково токсическое действие нитратов на организм человека?

3.Сущность методов экстракции нитратов и n-нирозаминов из пищевых продуктов?

4. Каково назначение кадмиевой колонки?

5. В чём заключается фотометрический метод анализа?

1   2   3   4   5   6

Похожие:

Образован в 1953 году iconОбразован в 1953 году
Настоящая работа является продолжением цикла учебно-практических пособий «Физика. Ч. 1 – Ч. 3»

Образован в 1953 году iconОбразован в 1953 году Кафедра физики и высшей математики
Министерство образования российской федерации московский государственный университет технологий и управления

Образован в 1953 году iconОбразован в 1953 году Кафедра физики Дистанционное обучение
В пособии даны общие методические указания по работе над курсом физики, список литературы, рекомендуемой для изучения курса, рабочая...

Образован в 1953 году iconРайон образован 20 августа 1930 года делением Аргаяшского кантона...
...

Образован в 1953 году icon1. Общая характеристика предприятия
Колхоз «Юбилейный» образован в 1968 году в результате реорганизации колхоза «Заря»

Образован в 1953 году iconГрани Агни Йоги 1953 год Часть I грани Агни Йоги. 1953 г
Записи Бориса Николаевича Абрамова, ближайшего ученика Н. К. Рериха, полученные из Высокого Источника, о чем имеется подтверждение...

Образован в 1953 году iconСоздания ветеринарного факультета послужила кафедра основ ветеринарии,...
С. М. Воробьёв, приехавший из Ленинграда. На кафедре с 1953 года работали доцент В. В. Куликов (основы ветеринарии и акушерства),...

Образован в 1953 году iconЯнтиковский район образован в 1935 г. Площадь 52,46 кв км, с/х угодий...
Янтиковский район образован в 1935 г. Площадь – 52,46 кв км, с/х угодий – 33,92 тыс га. Районный центр – с. Янтиково (здание администрации...

Образован в 1953 году iconРешением Моршанского городского Совета народных депутатов
Город Моршанск образован в долине реки Цны на месте старинного поселения Морша. Первые упоминания о поселении относятся к XVI в

Образован в 1953 году iconСвами Муктананда
Он основал Общину праведной жизни в Ришикеше в 1936 году, Аюрведическую аптеку Шивананды в 1945 году, Лесную академию Йога веданта...

Вы можете разместить ссылку на наш сайт:
Школьные материалы


При копировании материала укажите ссылку © 2013
контакты
zadocs.ru
Главная страница

Разработка сайта — Веб студия Адаманов