Руководство подготовлено в соответствии с примерной программой по дисциплине «Биологическая химия»




НазваниеРуководство подготовлено в соответствии с примерной программой по дисциплине «Биологическая химия»
страница9/40
Дата публикации18.08.2013
Размер4.46 Mb.
ТипРуководство
zadocs.ru > Химия > Руководство
1   ...   5   6   7   8   9   10   11   12   ...   40

^ Порядок выполнения работы

Споласкивают рот, в чистую пробирку собирают 2-3 мл слюны, которую разводят в 5 раз.

В две пронумерованные пробирки приливают по 5 капель разведенной слюны. В 1 пробирку добавляют 10 капель 1% раствора крахмала, во 2- 10 капель 1% раствора сахарозы. Обе пробирки помещают на 10 минут в термостат или водную баню при температуре 38оС, после чего содержимое пробирок делят на 2 части, с одной проделывают реакцию на крахмал, с другой реакцию Троммера.

^ Качественная реакция на крахмал

К исследуемой жидкости добавить 1-2 капли раствора Люголя. При наличии крахмала отметьте появление темно-синего окрашивания.

^ Реакция Троммера

К 5 каплям исследуемой жидкости прибавляют 5 капель 10% раствора NaOH и 5 капель раствора CuSO4 и нагревают. В присутствии глюкозы и мальтозы выпадает желтый осадок гидрата закиси меди или красный осадок закиси меди. Полученный результат занести в таблицу.



п/п

Субстрат

Фермент

Температура

Реакция на крахмал с йодом

Реакция Троммера

Выводы

1.



















2.



















Сделайте вывод о субстратной специфичности фермента.
^ Работа № 3. Термолабильность ферментов.

Большинство ферментов термолабильны - при нагревании до 60-80о утрачивают каталитическую активность. Степень инактивирования зависит от длительности теплового воздействия. При низких температурах ферменты хорошо сохраняются, но скорость ферментативного катализа снижается. В термолабильности ферментов можно убедиться на примере действия ферментов слюны: амилазы и мальтазы.

^ Порядок выполнения работы

В чистую пробирку отливают небольшое количество разведенной слюны (2-3мл) и кипятят ее в течение 5-8 минут, после чего охлаждают В 3 пронумерованные пробирки наливают по 10 капель 1% раствора крахмала. В 1 пробирку добавляют 10 капель слюны, разведенной в 5 раз, во 2-ю 10 капель прокипяченной слюны, в 3-ю 10 капель воды (качестве контроля). Все пробирки помещают в термостат или водяную баню при температуре 38она 10 минут. После этого проделывают качественные реакции на крахмал и реакцию Троммера на продукты расщепления.

^ Реакция на крахмал. К 5 каплям исследуемого раствора приливают 1 каплю раствора йода в йодистом калии. В присутствии крахмала появляется синее окрашивание. Полученный результат занести в таблицу.



п/п

Субстрат

Фермент

Температура

Реакция на крахмал с йодом

Реакция Троммера

Выводы

1.



















2.



















3.




















^ Работа № 4. Влияние реакции среды (оптимум рН) на действие ферментов слюны.

Для проявления максимальной каталитической активности ферментов требуются определенные условия, в том числе оптимальная концентрация водородных ионов. Каждый фермент наиболее активен в пределах довольно узкой зоны рН, называемой оптимум рН. Активность ферментов уменьшается, если рН меняется в любую сторону от оптимального значения. Отклонение рН от оптимума влияет на степень ионизации фермента и субстрата, может нарушить связь между белковой частью фермента и их простетическими группами, может влиять на связывание субстрата с ферментами.

^ Оптимальное значение рН для некоторых ферментов

Фермент

рН

Пепсин

1,5-2,5

Трипсин

8,0-9,0

Сахараза кишечная

6,2

Амилаза слюны

6,9-7,0

Липаза желудочного сока

6,0

Липаза панкреатическая

7,0-8,5

Каталаза

7,0



^ Порядок выполнения работ

В 7 предварительно пронумерованных пробирок наливают 0,2 м раствор двузамещенного фосфорнокислого натрия и 0,1 м раствор лимонной кислоты в соотношениях, указанных в таблице. Получают буферные растворы с рН от 5,6 до 8,0. В каждую пробирку добавляют по 10 капель 1% раствора крахмала, по 10 капель слюны, разведенной в 100 раз. Перемешивают содержимое пробирок и помещают их в водяную баню или термостат при температуре 38о на 5-10 минут (в зависимости от индивидуальных особенностей активности слюны).

^ Влияние рН среды на активность амилазы



п/п

Кол-во

0,2 м р-ра Na2HPO4, мл

Кол-во р-ра лимонной к-ты, мл

рН смеси

Кол-во 0,5% р-ра крахмала на 1% р-р NaCl

Кол-во разведенной слюны(1:100), мл

Окрашивание с йодом

1.

0,58

0,42

5,6



по 10

капель



по 10

капель




2.

0,63

0,37

6,0




3.

0,69

0,31

6,4




4.

0,77

0,23

6,8




5.

0,87

0,13

7,2




6.

0,94

0,06

7,6




7.

0,97

0,03

8,0





Затем во все пробирки добавляют по 1 капле раствора йода в йодистом калии, перемешивают, наблюдают окраску и определяют рН, при котором амилаза действует наиболее активно. В зависимости от активности слюны ее можно разводить не в 100, а в 50 или 10 раз.

Эталоны ответов к тестовым заданиям

Вид 1. 1.1.-в; 1.2. –б; 1.3. –а;

Вид 2. 2.1.-В; 2-А; 3-Д; 4-Б; 5-Е; 6-Г;

2.2.-Г; 2-Б, В, Д; 3-Г; 4-Г; 5-Б; 6-Е; 7-Б.

Вид 3. 3.1. – 2,4; 3.2. -1,2,3,4,5.

Вид 4. 4.1.- Д (-, +, -); 4.2.-Д (-, +, -).
Эталоны ответов на ситуационные задачи

Задача 1. Как и большинство протеолитических ферментов, трипсин обладает специфичностью действия - этот фермент активен в отношении пептидных связей, образованных карбоксильной группой аргинина и лизина. Молекулы трипсина не атакуют друг друга, т.к. аминокислотные последовательности на поверхности молекулы трипсина не соответствуют его специфичности.
Задача 2. Согласно теории индуцированного соответствия (теории Кошленда), связываясь с активным центром, субстрат вызывает изменение пространственной формы молекулы фермента и переводит его в более устойчивую, стабильную конформацию.
Задача 3. Наличие сильного положительного заряда, большое число свободных орбиталей (следовательно, способность связывать большое число лигандов), возможность выступать в роли как акцептора, так и донора электронов – все эти свойства переходных металлов обусловливают их участие в биокатализе в качестве кофакторов.

^ Занятие № 6. Кинетика ферментативных реакций. Регуляция активности ферментов. Активаторы. Ингибиторы.

Цель занятия. В результате освоения темы занятия студент освоить основные положения ферментативной кинетики, механизмы активирования и ингибирования ферментов, лежащие в основе регуляции обмена веществ и действия многих лекарств.


Студент должен

знать:

уметь:

-основные положения кинетики ферментативных реакций, зависимость скорости ферментативной реакции от [S], [E], t, pH;

-механизмы активирования ферментов;

-классификацию и механизм действия различных классов ингибиторов.

-объяснить механизм активирования и ингибирования;

-графически изображать изменения кинетических характеристик фермента в присутствии различных видов активаторов и ингибиторов;

-решать ситуационные задачи по ферментативной кинетике.


^ Содержание занятия. На данном занятии студентам предстоит пройти проверку выполнения домашней работы (задания для самоподготовки), ответить на тесты программированного контроля и вопросы преподавателя. Лабораторный практикум включает изучение активирующего влияния анионов хлора и ингибирующее влияние ионов меди на активность амилазы слюны, а также эксперимент по ингибированию сукцинатдегидрогеназы малоновой кислотой.
^ Методические указания к самоподготовке

Для усвоения темы выполните задания, представленные в таблице.

№№

Задание

Указания к выполнению задания

1

2

3

1.

Изучите основы кинетики ферментативных реакций.

1. Напишите вывод константы Михаэлиса, объясните ее физический смысл.

2. Изучите зависимость скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата:

  1. напишите уравнение Михаэлиса-Ментен;

  2. дайте анализ уравнения;

  3. зарисуйте график зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации фермента;

  4. напишите уравнение Лайнуивера-Берка и его графическое выражение. В чем преимущества графика двойных обратных величин?

3. Охарактеризуйте зависимость скорости ферментативной реакции от концентрации фермента. Приведите график зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации фермента.

2.

Изучите влияние ингибиторов на активность фермента.

1. Приведите классификацию типов ингибирования ферментов:

1)

2)

3) и.т.д.

2. Приведите примеры неспецифических ингибиторов и объясните механизм их действия.

3. Схематически изобразите механизм действия:

а) конкурентного ингибитора

б) неконкурентного ингибитора

4.Изобразите графики Лайнуивера-Берка для конкурентного и неконкурентного ингибирования. Как изменяются кинетические характеристики фермента (Кm, Vmax) при действии различных видов ингибиторов?

5. Дайте определение понятию «аллостерический центр». В чем особенность кинетики аллостерических ферментов?

6. Приведите примеры использования различных типов ингибиторов ферментов в качестве лекарственных средств.

3.

Изучите влияние активаторов на скорость ферментативных реакции.

1.Перечислите основные типы активировании ферментов.

2.Изучите механизмы активирующего действия ионов металлов, анионов. Приведите примеры ферментов, активируемых металлами.

3. Активация путем ограниченного протеолиза. Для каких ферментов наиболее характерен такой тип активации? Какой это имеет биологический смысл?

4. Изучите аллостерическую активацию ферментов. Приведите примеры ферментов, активируемых путем ассоциации, диссоциации субъединиц, ковалентной модификации (фосфорилирования-дефосфорилирования).


Примеры тестов контроля исходного уровня знаний

Вид 1. Выберите один наиболее верный ответ.

1.1. Гексокиназа катализирует реакцию фосфорилирования гексоз. Кm гексокиназы для аллозы составляет 8´10-3 моль/л, а для маннозы – 5´10-6 моль/л. Какой из субстратов будет фосфорилироваться с наибольшей скоростью, если их концентрация в среде инкубации одинакова и составляет 8´10-7 моль/л?

а) аллоза

б) манноза

в) скорость превращения обоих субстратов будет одинакова

г) имеющиеся данные не позволяют ответить на поставленный вопрос
1.2. Константа Михаэлиса … .

а) численно равна ½ Vmax

б) не зависит от рН

в) численно равна [S], при которой скорость равна ½ Vmax

г) зависит от концентрации фермента
Вид 2.

2.1. Регуляция активности фермента – механизм регуляции.

  1. увеличение количества А. взаимодействие с белковыми

ферментативного белка ингибиторами

2. уменьшение количества Б. действие протеинкиназ

протеиназ В. индукция генов

3. модификация активности Г. ограниченный протеолиз

в результате фосфорилиро-

вания белка

4. активация зимогенов
2.2. Определите тип ингибирования

1.циклооксигеназы аспирином а) конкурентное

2.сукцинатдегидрогеназы малоновой кислотой б) необратимое

3. холинэстеразы прозерином в) аллостерическое

4. холинестеразы диизопропилфосфатом

5.ингибирование глюкозо-6-фосфотазы инсулином
2.3. Типы ингибирования ферментов – механизм.


1. необратимое

2. обратимое

3. конкурентное

4. неконкурентное

5.аллостерическое

А. молекула ингибитора вызывает стойкое изменение в молекуле фермента

Б. ингибитор сходен по структуре с субстратом

В. вид ингибирования, включающий конкурентное и неконкурентное ингибирование

Г. ингибитор не имеет структурного сходства с субстратом и часто связывается с ферментом вне активного центра, изменяя его конформацию

Д. ингибирование, связанное с изменением конформации ферментного белка в результате воздействия на регуляторный центр ферментов


Вид 3. Правильное сочетание ответов.

3.1. Лекарственные вещества-антиметаболиты являются конкурентными ингибторами, если … .

  1. необратимо связываются с ферментом

  2. обратимо связываются с ферментом

  3. нет зависимости между степенью ингибирования и концентрацией субстрата

  4. прочно соединяются с простетической группой фермента

  5. вызывают денатурацию фермента


3.2 Аллостерические ферменты как правило имеют… .

1. четвертичную структуру

2.сигмоидный график зависимости V от [S]

3.низкомолекулярный лиганд -регулятор

4. простетическую группу

5. высокие значения Кm
Вид 4. Определите правильность утверждений и связь между ними

4.1. При действии фосфакола (представитель фосфорорганических соединений) уменьшается количество ацетилхолина в синаптической щели, потому что происходит фосфорилирование фосфаколом ОН –группы серина в активном центре холинэстеразы.

4.2. Активность ферментов в присутствии ингибиторов снижена, потому что в присутствии конкурентных ингибиторов возникают конформационные изменения молекул ферментов.
Примеры ситуационных задач

Задача 1. Проанализируйте данные экспериментов по определению скорости ферментативной реакции при различных концентрациях субстрата, а также в присутствии ингибитора. По имеющимся данным постройте график Лайнуивера–Берка, определите Кm фермента и тип ингибирования.



Концентрация

субстрата, М

^ Скорость реакции, мкмоль/мин

Скорость в присутствии ингибитора, мкмоль/мин

6´10-6

1´10-5

2´10-5

6´10-5

1,8´10-4

20,8

29

45

67,6

87

4,2

5,8

9

13,6

16,2


Задача 2. Используя график Лайнувивера-Берка, проанализируйте, как изменились кинетические характеристики фермента в присутствии ингибитора. Определите тип ингибирования.



Задача 3. Зависимость V от [S] для реакции, катализируемой транскарбамоилазой, выражается сигмоидной (S-образной) кривой. После воздействия на фермент солями ртути (II) каталитическая активность фермента резко возрастает, а кривая зависимости скорости реакции от концентрации субстрата становится гиперболической. Какие выводы о механизме активации фермента ионами ртути можно сделать? Приведите примеры других ферментов, активируемых подобным образом.
^ Самостоятельная работа студентов

Работа № 1. Влияние активаторов и ингибиторов на активность

амилазы ротовой жидкости.

Целью данной работы является установление актвирующего и ингибирующего влияния различных ионов на каталитическую активность ферментов. Так, например, ионы натрия и хлора стимулируют активность амилазы слюны, а ионы меди, наоборот, тормозят ее.

^ Ход работы. Споласкивают рот, в чистую пробирку собирают 3мл слюны и разводят ее в 10 раз ( добавить 27 мл дистиллированной воды). В три пробирки налить по 10 мл разведенной в 10 раз слюны. В первую пробирку добавить 1 мл 1% раствора NaCl, во вторую-1 мл 1% раствора CuSО4, в третью- 1 мл дистиллированной воды (контроль). После этого в каждую пробирку прилить по 4 мл 0,5% раствора крахмала, пробирки встряхнуть и поместить в водяную баню или в термостат с температурой 380С на 10 мин. После истечения указанного времени с содержимым каждой пробирки проделать качественную реакцию на крахмал и пробу Троммера: к 5 каплям исследуемой жидкости прибавить 5 капель 10% раствора NaOH и 5 капель раствора CuSO4 и нагреть.

Полученные результаты занесите в таблицу, определите тип активирования и тип ингибирования.




п/п

Субстрат

Фермент

Добавляемое вещество

Проба на

крахмал

Проба

Троммера

Вывод


^ Работа № 2. Конкурентное торможение сукцинатдегидрогеназы

малоновой кислотой.

Принцип метода основан на изменении окраски метиленовой сини при восстановлении его в ходе окислительно-восстановительной реакции. При дегидрировании янтарной кислоты сукцинатдегидрогеназой акцептором водорода является метиленовая синь, которая при восстановлении обесцвечивается. Чем быстрее обесцвечивается метиленовая синь, тем выше активность сукцинатдегидрогеназы. Ингибирование фермента замедляет скорость обесцвечивания метиленовой сини.

^ Ход работы. В три пронумерованные пробирки поместить 3-4 капли мышечной кашицы и добавить: в первую – 0,8 мл воды, во вторую- 0,2 мл 1% раствора малоновой кислоты и 0,6 мл воды, в третью – 0,8 мл 1% раствора малоновой кислоты. Во все три пробирки добавляют по 1 мл 1% раствора янтарной кислоты и по 1 капле 1% раствора метиленовой сини. После перемешивания добавляют по 3 капли вазелинового масла. Пробирки ставят в водяную баню, нагретую до 370С. Через 5 мин наблюдают изменение окраски раствора. Сравните степень уменьшения голубого окрашивания в 3-х пробирках и сделать вывод о механизме действия малоновой кислоты на активность сукцинатдегидрогеназы.

Отметьте результат и сделайте вывод.
Эталоны ответов к тестовым заданиям

Вид 1. 1.1. – б; 1.2 –в;

Вид 2. 2.1. 1-В; 2-А; 3-Б; 4-Г;

2.2.: 1-б; 2-а; 3-а; 4-б; 5-в;

2.3.: 1-А; 2-В; 3-Б; 4-Г; 5-Д;

Вид 3. 3.1.- 2, 4; 3.2.- 1, 2, 3;

Вид 4. 4.1. -Д (-, +, -); 4.2. - С (+, -, -).
Эталоны ответов на ситуационные задачи

Задача 1. График Лайнуивера-Берка – график двойных обратных величин (1/V против 1/S).


Отрезок на горизонтальной оси =

Отрезок на вертикальной оси =

Тип ингибирования неконкурентный, т.к. в присутствии ингибитора Кm (т.е. сродство фермента к субстрату ) не изменилось.
Задача 2. В присутствии ингибитора прямая прошла через ту же точку на оси ординат, тогда как отрезок на оси абсцисс, с помощью которого можно рассчитать Km уменьшился. Исходное значение Km=-1/-1 =1 ммоль/л, в присутствии ингибитора- Km=-1/-0,5=2 ммоль/л. Увеличение значения Km отражает уменьшение сродства к ферменту, что наблюдается при конкурентном ингибировании.
Задача 3. Сигмоидный характер кривой зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата характерен для аллостерических ферментов, являющихся, как правило, олигомерными белками. S-образная форма кривой отражает кооперативное взаимодействие субъединиц при связывании субстарата. При воздействии солей ртути происходит диссоциация олигомера и высвобождается каталитически более активная субъединица, имеющая характеристики, подчиняющиеся кинетике Михаэлиса-Ментен. Подобным образом активируется и фермент протеинкиназа А, в данном случае диссоциация неактивного олигомера инициируется циклическим АМФ.

^ Занятие № 7. Количественное определение активности ферментов. Основные принципы энзимодиагностики и энзимотерапии.

Цель занятия освоить методы определения активности ферментов и единицы выражения активности ферментов, охарактеризовать значение определения активности ферментов для диагностики заболеваний.



Студент должен

знать:

уметь:

-изоферменты, мультиэнзимные комплексы;

-единицы измерения активности ферментов;

-условия определения активности ферментов;

-основные направления медицинской энзимологии - энзимопатологию,

энзимодиагностику, энзимотерапию.

-решать ситуационные задачи по энзимопатологии и энзимодиагностики;

-оценить диагностическую значимость определения активности ферментов в биологических средах.


^ Содержание занятия. На данном занятии после проверки выполнения заданий по самоподготовке студентам предстоит ответить на тесты программированного контроля и вопросы преподавателя. Лабораторный практикум включает определение активности амилазы слюны, лактатдегидрогеназы и ее изоферментов в сыворотке крови.
^ УИРС. Обсуждение реферативных сообщений, решение ситуационных задач, исследование активности амилазы мочи.
Методические указания к самоподготовке

Для усвоения темы выполните следующие задания.

№№

Задание

Указания к выполнению задания

1

2

3

1.

Изучите изоферменты, множественные формы ферментов и мультиферментные комплексы.

1. Охарактеризуйте изоферменты, дайте определение терминам «изоферменты» и «множественные формы ферментов».

2. Приведите примеры ферментов, имеющих изоферментный спектр.

3. Объясните, каков биологический смысл того, что многие регуляторные ферменты имеют изоферменты. Приведите примеры.

4. Напишите, сколько изоферментов имеют лактатдегидрогеназа (ЛДГ) и креатинкиназа, щелочная фосфатаза, дайте характеристику каждому из них.

5. Объясните, какое диагностическое и прогностическое значение имеет определение изоферментного спектра ферментов сыворотки крови и мочи в клинике.

6. Дайте определение понятию «мультиферментный комплекс».

7. Приведите примеры мультиэнзимных комплексов.

2.

Изучите методы определения активности ферментов.

1. Укажите, на каком свойстве ферментов основано определение их активности в биологических жидкостях.

2. Какими методами можно следить за превращением субстрата и образованием продуктов реакций при действии амилазы слюны и фосфатазы в сыворотки крови.

3. Напишите, что принимается за единицу каталитической активности фермента. Что такое катал, международные единицы активности?

4. Напишите, что называется числом оборота или молекулярной активностью, удельной активностью фермента.

5. В каких условиях производят измерение активности ферментов для того, чтобы скорость ферментативной реакции была пропорциональна концентрации фермента ?

3.

Изучите основные направления медицинской энзимологии.

1.Что такое энзимопатология? Приведите примеры заболеваний, связанных с генетическими дефектами различных ферментов.

2. Приведите примеры использования ферментов в качестве лекарственных средств.

3. Что такое энзимодиагностика? Выпишите примеры ферментов (таблица), используемых в диагностике заболеваний. Что такое органоспецифичные ферменты?

4.

Изучите иммобилизованные ферменты (ИФ)

1. Что означает термин «иммобилизованные ферменты»(ИФ)?

2. Выпишите преимущество ИФ при использовании их в практических целях.

3. Выпишите сведения о способах иммобилизации ферментов и материалах (носителях), используемых в современной практике.

4. Охарактеризуйте применение ИФ в медицине, промышленности.

5. Ознакомьтесь с принципом метода иммуноферментного анализа (ИФА), в котором ферменты, иммобилизованые на поверхности антител, используются в качестве реагентов тест-системы.


^ Ферменты, наиболее широко используемые в диагностике


фермент

Заболевания, при которых активность

фермента повышается в крови

АлАТ

(аланинаминотрансфераза)

АсАТ (аспартатаминотрансфераза)

Амилаза

Лактатдегидрогеназа
Креатинкиназа

γ-Глутамилтранспептидаза

Панкреатическая липаза

Кислая фосфатаза

Щелочная фосфатаза (изоферменты)
Глутаматдегидрогеназа

Сорбитолдегидрогеназа

Гепатиты, инфаркт миокарда
Инфаркт миокарда, гепатиты, заболевания почек
Острый панкреатит, паротит

Инфаркт миокарда (изофермент ЛДГ1), гепатиты. заболевания скелетных мышц (изоферменты ЛДГ4,.5)

Инфаркт миокарда (изофермент МВ-типа), заболевания скелетных мышц (преимущественно КК- ММ), инсульт мозга (ВВ-)тип

Гепатиты, цирроз, алкогольное повреждение печени

Острый панкреатит, рак поджелудочной железы

Карцинома предстательной железы

Заболевания костей, гепатиты, желчнокаменная болезнь и др. заболевания, сопровождающиеся холестазом (задержка выделения желчи)

Острые гепатиты

Острые гепатиты

^ Основы иммуноферментного анализа

Сущность ИФА, относящегося к иммунохимическим методам, заключается в специфическом взаимодействии антигена и антитела с последующим присоединением к образующемуся комплексу коньюгата – анти-антитела, меченного ферментом. Фермент вызывает превращение неокрашенного субстрата (хромогена) в окрашенный продукт, выявляемый фотометрически. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации комплекса антиген-антитело. В качестве иммобилизованного на поверхности анти-антитела (антивидового иммуноглобулина) фермента чаще используются пероксидазы. При разложении ими Н2О2 выделяется кислород, вызывающий окисление хромогена в окрашенный продукт.

Процедура твердофазного ИФА (ELISA - еnzyme-linked immunosorbent assay) включает следующие этапы:

1) специфическое связывание антигена (2), пришитого к твердой фазе (1- планшета) с имеющимся в сыворотке антителом(3);


2) образование коньюгата – присоединение анти-антител, меченных ферментом (4);


3)сопряженное с энзиматической реакцией образование окрашенного продукта



Клинико-диагностическое значение ИФА

ИФА широко используется в клинике с целью:

  1. диагностики инфекционных и паразитарных заболеваний;

  2. количественного определения гормонов и других биологически активных соединений;

  3. диагностика ранних сроков беременности;

  4. выявление онкомаркеров.

Примеры тестов контроля исходного уровня знаний

Вид 1. Один наиболее верный ответ.

1.1. Молярная активность (число оборотов) выражается в … .

а) моль/мг мин б) моль/сек в) кат/ г-моль г) моль/кг сек
1.2. Мультиэнзимные комплексы представляют собой … .

а) надмолекулярные структуры

б) иммобилизованные ферменты

в) олигомерные белки

г) множественные формы ферментов
Вид 2. Установите соответствие.

2.1. Наследственное заболевание – дефектный фермент

1. фенилкетонурия а) глюкозо-6-фосфатаза

2. алкаптонурия б) тирозиназа

3. болезнь Гирке в) фенилаланингидроксилаза

4. галактоземия г) гомогентезиназа

5. альбинизм д) галактокиназа
2.2. Единицы измерения активности ферментов

1. число оборотов а) кат/г-моль

2. катал б) мкмоль/мин

3. международные единицы в) моль/сек
2.3. Заболевание – индикаторный фермент.

1. острый панкреатит а) ЛДГ(изоферменты)

2. вирусный гепатит б) аминотрансферазы

3. заболевания костей в) креатинкиназа (изоферменты)

4. механическая желтуха г) щелочная фосфатаза (изоферменты)

5. рак предстательной железы д) кислая фосфатаза

6. инфаркт миокарда е) α-амилаза
Вид 3. Правильное сочетание ответов.

3.1. Преимущества иммобилизованных ферментов:

  1. имеют большую специфичность к субстрату

  2. отличаются большей активностью

  3. отличаются механизмом катализа

  4. имеют большую стабильность

  5. не могут использоваться многократно


3.2. Изоферменты лактатдегидрогеназы отличаются …

1. субъединичным составом

2. тканевой локализацией

3. электрофоретической подвижностью

4. внутриклеточной локализацией

5. катализируемой реакцией
Вид 4. Определите правильность утверждений в предложении и

установите наличие причинной связи между ними.

4.1. Определение активности ферментов необходимо производить при полном насыщении фермента субстратом - при Кm>[S], поскольку именно в этих условиях скорость реакции будет пропорциональна концентрации фермента.
4.2. При электрофорезе в полиакриламидном геле изофермент ЛДГ 1 первым мигрирует к аноду, поскольку состоит из 4-х М-субъедниц, обладающих наибольшим отрицательным зарядом.
Примеры ситуационных задач
1   ...   5   6   7   8   9   10   11   12   ...   40

Похожие:

Руководство подготовлено в соответствии с примерной программой по дисциплине «Биологическая химия» iconФедеральное государственное бюджетное образовательное учреждение...
Настоящие методические указания составлены в соответствии с Федеральным государственным образовательным стандартом впо и примерной...

Руководство подготовлено в соответствии с примерной программой по дисциплине «Биологическая химия» iconУчебно-методический комплекс по дисциплине «Идентификация и фальсификация...
Перышкина Н. А. Идентификация и фальсификация продовольственных товаров. Учебно-методический комплекс. – Уфа: уи (ф) ргтэу, 2009....

Руководство подготовлено в соответствии с примерной программой по дисциплине «Биологическая химия» iconОбщие методические указания по выполнению и защите курсовых работ...
Методическое руководство к выполнению курсовой работы выполнено в соответствии с требованиями государственного образовательного стандарта...

Руководство подготовлено в соответствии с примерной программой по дисциплине «Биологическая химия» iconОдобрено учебно-методическим советом юридического факультета финансовое...
Учебно-методический комплекс по финансовому праву составлен в соответствии с требованиями Государственного образовательного стандарта...

Руководство подготовлено в соответствии с примерной программой по дисциплине «Биологическая химия» iconУчебное пособие. М.: Право и Закон, 1997. 320 с. Isbn
Учебное пособие подготовлено выдающимся российским психологом-правоведом профессором Юрием Валентиновичем Чуфаровским в соответствии...

Руководство подготовлено в соответствии с примерной программой по дисциплине «Биологическая химия» iconУчебное пособие для студентов высших учебных заведений подготовлено...
...

Руководство подготовлено в соответствии с примерной программой по дисциплине «Биологическая химия» iconРоссийской Федерации Федеральное агентство по образованию Государственное...
Учебно-методический комплекс составлен в соответствии с Государственным образовательным стандартом высшего профессионального образования...

Руководство подготовлено в соответствии с примерной программой по дисциплине «Биологическая химия» iconЮридическая психология. Учебное пособие
Учебное пособие подготовлено выдающимся российским психологом-правоведом профессором Юрием Валентиновичем Чуфаровским в соответствии...

Руководство подготовлено в соответствии с примерной программой по дисциплине «Биологическая химия» iconРабочая программа по истории россии, XX
Рабочая программа курса истории России для 11-х классов составлена в соответствии с Федеральной примерной программой в рамках нового...

Руководство подготовлено в соответствии с примерной программой по дисциплине «Биологическая химия» iconУчебно-методическое пособие подготовлено в соответствии с программой...
Утверждено редакционно-издательским советом академии в качестве учебного пособия для студентов 3-го курса факультета заочного обучения...

Вы можете разместить ссылку на наш сайт:
Школьные материалы


При копировании материала укажите ссылку © 2013
контакты
zadocs.ru
Главная страница

Разработка сайта — Веб студия Адаманов