Скачать 1.52 Mb.
|
^ АТФ в виде нерастворимой бариевой соли осаждается из раствора в щелочной среде после добавления уксуснокислого бария. Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Ступка с пестиком. 3. Центрифуга Реактивы. 1. Ткани животных (сердце, мозг, печень, скететная мышца, почки и т.д.). 2. ТХУ, 25%-ный раствор. 3. Фенолфталеин, 0,01%-ный раствор. 4. Гидроксид натрия, 10%-ный раствор. 5. Бария ацетат, 25%-ный раствор.
Обнаружение АТФ.
Опыт 2. Сопоставление окислительно-восстановительных потенциалов рибофлавина. Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Набор пипеток. Реактивы. 1. Дистиллированная вода. 2. Рибофлавин, 0,025%-ный раствор. 3. Метиленовая синь, 0,01%-ный раствор. 4. Соляная кислота, концентрированная. Для исследования окислительно-восстановительных потенциалов применяют индикаторы, имеющие свой цвет при определенном значении этого потенциала.
Объясните наблюдаемые явления. Сопоставьте окислительно-восстановительный потенциал рибофлавина и метиленовой сини. Опыт 3. Открытие альдегиддегидрогеназы в молоке. Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Набор пипеток. 3. Водяная баня. 4. Пробки. Реактивы. 1. Молоко, кипяченое и некипяченое. 2. Формалин, 0,4%-ный раствор. 3. Метиленовая синь, 0,01%-ный раствор.
Определите, в какой пробирке содержалось некипяченое молоко? Объясните, почему Вы сделали такой вывод? Почему после встряхивания обесцвеченной пробирки произошло изменение цвета? Опыт 4. Качественное определение креатинина. Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Набор пипеток. 3. Газовая горелка. 4. Держатели для пробирок. Реактивы. 1. Мышечная ткань. 2. Пикриновая кислота, насыщенный раствор. 3. Гидроксид натрия, 10%-ный раствор.
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________ ^ Цель занятия: изучить механизм некоторых реакций цикла Кребса. Освоить метод количественного определения пировиноградной кислоты в моче. ^
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________ Экспериментальная работа. Одним из методов количественного анализа в биохимии является фотокалориметрия. Метод основан на измерении оптической плотности окрашенных растворов, которые получают при взаимодействии субстрата с различными химическими агентами. Концентрация субстрата пропорциональна степени окрашивания раствора. Перед началом лабораторных опытов ознакомьтесь с устройством КФК и правилами работы на нем. Опыт 1. Определение концентрации пировиноградной кислоты (ПВК) в моче. Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Набор пипеток. 3. Фотоколориметр. 4. Кюветы, 0,5 см. Реактивы. 1. Дистиллированная вода. 2. Моча. 3. Гидроксид натрия, 10%-ный раствор. 4. 2,4-динитрофенилгидразин, раствор. ПВК крови конденсируется с 2,4-динитрофинилгидразином с образованием гидразона, который в щелочной среде дает коричнево-красный цвет раствора. По интенсивности его окраски судят о содержании ПВК.
Концентрация ПВК = ![]()
![]() Калибровочный график зависимости величины оптической плотности раствора (D) от концентрации ПВК в пробе. Сравните полученные значения с нормальными величинами. Каковы причины повышенного содержания пировиноградной кислоты в сыворотке крови и моче? *Стандартный, 1 мг%-ный раствор ПВК готовится из основного раствора путем смешивания 5 мл основного раствора ПВК со 100 мл воды. Основной раствор ПВК готовят разведением 20 мг ПВК или 25 мг пирувата натрия в 100 мл дистиллированной воды. Опыт 2. Определение активности сукцинатдегидрогеназы мышц. Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Набор пипеток. 3. Ступка с пестиком. 4. Водяная баня. Реактивы. 1. Мышечная ткань. 2. Янтарная кислота, 5%-ный раствор. 3. Метиленовая синь, 0,01%-ный раствор. 4. Растительное масло. 5. Стеклянный песок.
Дайте объяснение наблюдаемым явлениям. Какова функция метиленовой сини в данном эксперименте? На какое соединение эта функция возлагается в живой клетке? Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________ ^ Цель занятия: рассмотреть факторы, влияющие на переваривание углеводов; освоить метод количественного определения глюкозы в крови. ^
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________ Экспериментальная работа. Опыт 1. Воздействие формальдегида на активность амилазы. Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Набор пипеток. 3. Водяная баня. Реактивы. 1. Крахмал, 1%-ный раствор. 2. Амилаза, раствор. 3. Йод, 1%-ный раствор. 4. Формальдегид, 5%-ный раствор.
Объясните полученные результаты. Где на практике животные могут столкнуться с формальдегидом? Опыт 2. Определение концентрации глюкозы в биологических жидкостях ортотолуидиновым методом. Для определения глюкозы в биологических жидкостях по данному методу в настоящее время различными фирмами выпускаются наборы реактивов. Поэтому суть работы сводится только к правильному использованию набора реактивов согласно инструкции по применению. Глюкоза с ортотолуидином в кислой среде при повышенной температуре образует комплексное соединение сине-зеленого цвета. Интенсивность окраски раствора пропорциональна концентрации глюкозы в исследуемой пробе. ^ Без осаждения белков анализируют сыворотку и плазму крови, мочу. Мочу перед анализом разбавляют дистиллированной водой в соотношении от 1:10 до 1:500 и в последующем результат умножают на степень разведения.
Рассчитайте концентрацию глюкозы по формуле: ![]() где Х концентрация глюкозы в калибровочном растворе. Сравните полученные величины с нормальными значениями. Сделайте вывод о состоянии животного. В случае отклонения полученных значений от нормальных величин, предложите возможные причины, объясняющие данный результат. Назовите факторы, вызывающие гипогликемию и гипергликемию в крови животных. Опыт 3. Обнаружение сахара в моче с помощью качественной пробы Троммера. Появление сахара в моче наблюдается при бешенстве, нервной форме чумы собак, нарушениях функции печени, панкреатической железы и др. У лошадей глюкозурия встречается реже, чем у собак. Лактозурия наблюдается при родильном парезе, воспалении вымени, закупорке сосудов, маститах. Приборы. 1. Штатив с пробирками. 2. Набор пипеток. 3. Держатель для пробирок. 4. Газовая горелка. Реактивы. 1. Моча. 2. Гидроксид натрия, 10%-ный раствор. 3. Сульфат меди, 2%-ный раствор.
Сделайте вывод по результатам эксперимента. Опыт 4. Полуколичественное определение глюкозы в моче. Приборы. 1. Ступка с пестиком. 2. Весы. 3. Предметное стекло. 4. Газовая горелка. 5. Пипетка. Реактивы. 1. Моча. 2. Сульфат меди, кристаллический. 3. Карбонат натрия, кристаллический.
Запишите Ваши результаты. Сравните результаты с предыдущим опытом. Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________ |
![]() | Учебное пособие предназначено для студентов педиатрического и стоматологического факультетов медицинских вузов. Материалы пособия... | ![]() | Предмет и задачи биологической химии. Объекты биохимического исследования. Место биохимии среди других биологических дисциплин. Основные... |
![]() | Стороженко Валентина Николаевна; кандидат химических наук, доцент кафедры органической, биологической и физколлоидной химии Летичевская... | ![]() | ... |
![]() | Практикум содержит лабораторные работы разной степени сложности, позволяющие студентам приобрести навыки самостоятельного биохимического... | ![]() | Цель работы: экспериментальное определение частотной дисперсии электропроводности биологической ткани, определение импеданса биологической... |
![]() | По сертификации и испытательных лабораторий (центров),выполняющих работы по подтверждению соответствия,аттестации экспертов по аккредитации,... | ![]() | Методические рекомендации предназначены для студентов-медиков и являются руководством в самостоятельной подготовке к семинарам и... |
![]() | Методические указания составлены сотрудниками кафедры биохимии и фармакологии медицинского факультета БелГУ: кандидатом биологических... | ![]() | Предмет и задачи биологической химии. Место биохимии среди других биологических наук |