Исследование мочи
Скачать 1.52 Mb.
|
^ Реактивы- 1 Эозин метиленовый синий по Маю—Грюнвальду 2 Азур эозиновая смесь по Романовскому Ход определения Тонкие мазки крови фиксируют в эозин метиленовом синем по Маю—Грюнвальду 3 мин Мазки смывают, высушивают и окрашивают азур-эозиновой смесью по Романовскому 30 мин Затем мазки промывают водой, высушивают и микроскопируют (иммерсионная система) Подсчитывают количество тромбоцитов на 1000 эри троцитов (т е 5 полей зрения по 200 эритроцитов в каждом) Расчет А—количество тромбоцитов на 200 эритроцитов; В—количество эритроцитов в 1 мкл:  Количество тромбоцитов в норме 200000—400000 в 1 мкл ^ Ре актив—0,5% водный раствор метиленового синего Ход определения Тонкие мазки крови, взятые без стабилизаторов, высушивают На мазок наносят небольшую каплю 0,5% раствора метиленового синего и покрывают покровным стеклом. Краска равномерно распределяется между стеклами. Через 20—30 с на покровное стекло наносят иммерсионное масло и микроскопируют, используя иммерсионную систему Подсчитывают количество тромбоцитов и ретикулоцитов одновременно на 1000 эритроцитов. Обычно достаточно подсчитать 5 полей зрения по 200 эритроцитов в каждом поле зрения. Тромбоциты при этом окрашиваются в синий цвет. Зернисто сетчатая субстанция ретикулоцитов также окрашивается в синий цвет, эритроциты — в нежно голубой. ^ ^Принцип Использование свойства крови, смешанной с раствором трехзамещенного цитрата (лимоннокислого) натрия, не свертываться при стоянии и разделяться на два слоя нижний—эритроциты и верхний— плазму Это расслоение происходит с различной скоростью в зависимости от изменения химических и физических свойств крови. Скорость оседания выражается в миллиметрах за час. Реактив — 5% водный раствор трехзамещенного цитрата натрия, профильтровывают. Раствор нестоек, его следует готовить в небольшом количестве и держать в холодильнике, при помутнении—заменять свежим. Ход определения Капиллярную пипетку промывают 5% раствором цитрата натрия. Набирают этот раствор до метки Р (50 мм) и выдувают его в видалев-скую пробирку. Гем же капилляром набирают кровь из Пальца до метки К, дважды и хорошо смешивают с раствором цитрата натрия в пробирке Затем смесь насасывают до метки 0, ставят в штагив Панченкова строго вертикально и через час отмечают величину столбика плазмы (рис. 6) В норме СОЭ у мужчин до 10 мм/ч, у женщин до 14—15 мм/ч1. ^ Кровь из пальца берут после удаления первой капли. В сухой капилляр для определения скорости оседания эритроцитов набирают столбик крови высотой 20— 30 мм. Наклоном капилляра кровь переводят на середину трубки Зажав концы капилляра между двумя пальцами, наклоняют его в обе стороны на 30—45°. 1 У детен СОЭ зависит от возраста у новорожденных — до 2 мм/ч, у детей 1р}дного возраста—до 4 мм/ч, у детей более стар шио возраста w 10 mm^i Смещение крови указывает, что свертывание еще не наступило Начало свертывания отмечают от момента за медлеиия движения крови при наклоне капилляра и по-яв гения на внутренней стенке капилляра небольших сгустков Момент полной остановки в движении крови соответствует полному свертыванию крови. Норма начало свертывания крови 30 с—2 мин, конец—4—8 мин. ^ Принцип основан на определении времени кровотечения от момента нанесения ранки на коже до момента прекращения кровотечения. Ход определения Кончик пальца или мочки уха обрабатывают спиртом. После укола кончика пальца или мочки уха иглой на глубину 3—4 мм выступившую самостоятельно каплю крови снимают фильтровальной бумагой каждые 30 с. Продолжительность кровотечения в норме не превышает 4 мин ^ Паразиты малярии могут быть обнаружены в крови не только во время приступов, но и в период между • ними, поэтому мазки можно брать в любое время независимо от температуры тела Кровь берут обычным способом из мякоти пальца. Предметные стекла должны быть тщательно вымыты. Кроме обычных мазков при исследовании на присутствие плазмодиев малярии необходимо брать еще так называемую толстую каплю Она намного сокращает время исследования и облегчает нахождение паразитов там, где их мало. Приготовление толстой капли. К капле крови, выступившей из укола, осторожно прикасаются поверхностью предметного стекла и легким круговым движением распределяют кровь на большей поверхно сти, для того чтобы слой крови не был толстым Обычно на одно стекло берут 2—3 капли на некотором расстоянии друг от друга и дают им высохнуть на воздухе без подогревания в горизонтальном положении (в течение около получаса) ^ не надо фиксировать, что очень важно помнить. После высыхания капли на нее наливают краситель Романовского, разведенный как обычно. Продолжительность окраски 30—45 мин. Окрашенную каплю осторожно ополаскивают водопроводной водой и просушивают в вертикальном положении. Фильтровальной бумагой ее обсушивать нельзя. При окраске капель происходит вы-щелачивание гемоглобина из эритроцитов, вследствие чего в окрашенной капле эритроциты не видны, лишь по краю капли можно иногда различить свободно лежащие тени эритроцитов. Из форменных элементов сохраняются лейкоциты и тромбоциты. При исследовании толстой капли нужно помнить, что в средней, более толстой части капли вероятность обнаружить паразитов большая, но иногда они бывают хуже окрашены по сравнению с паразитами, расположенными по краю капли. По краю капли лучше сохраняется форма паразитов, нередко эритроциты гемолизи-рованы не полностью. Plasmodium vivax отличается от других паразитов своей относительно большей величиной и полиморфизмом. Кольца редко сохраняют форму, они чаще бывают разорваны, и тогда к небольшому ядру прилегает кусочек цитоплазмы круглой, удлиненной или треугольной формы. Обычно наряду с кольцами видны и зрелые формы шизонтов. Цитоплазма крупных шизонтов часто бывает разорвана. Около ядра в различных положениях располагаются несколько комочков цитоплазмы, размер которых зависит от возраста шизонта. Морула в толстой капле легко узнается по мерозоитам, собранным в виде кучки вокруг зерен пигмента. Гамонты имеют круглую или овальную форму. Они трудно отличимы от шизонтов, готовящихся к делению. В хорошо окрашенных толстых каплях эритроциты, содержащие паразитов, ге-молизируются не полностью и сохраняются в виде розовых дисков с хорошо заметной шюффнеровской зернистостью, на фоне которых хорошо видны паразиты. Этот признак является очень важным, так как отсутствует у других видов плазмодиев и облегчает обнаружение паразитов Р. vivax. Отличить паразитов четырехдневной лихорадки от паразитов трехдневной лихорадки в толстой капле значительно труднее, чем в мазке. Кольца, так же как и 22 кольца Р. vivax, обычно бывают разорваны. Шизснты в виде круглых или овальных комочков, без вакуолей, с хорошо очерченными контурами. Шизонты разного возраста отличаются между собой по размерам—молодые более мелкие. Морула легко узнается по более крупным, чем Р. vivax, мерозоитам, собранным в виде венчика вокруг кучки пигмента. Гамонты трудно отличимы от шизонтов. При исследовании Р. falciparum в капле обнаруживается большое количество мелких колец. Кольца иногда разорваны, иногда имеют вид хорошо выраженного перстня. Гамонты легко узнаются по характерной полулунной форме. При медленном высыхании толстых участков капель зрелые гамонты могут округляться и становиться очень похожими на округлые шизонты Р. та-lariae. Поэтому нужно всегда исследовать кроме центральной, более толстой части капли, и края ее, где вследствие быстрого высыхания тонкого слоя крови гамонты хорошо сохраняют полулунную форму. Для выяснения более тонкой морфологии паразита следует исследовать обычный мазок крови. Мазки фиксируют и окрашивают обычным способом, несколько дольше, чем для исследования белой крови. При окраске по Романовскому в паразите можно различить ядро, которое окрашивается в вишнево-красный цвет, и цитоплазму, которая окрашивается в голубой цвет и представляется в разных формах в зависимости от стадии развития паразита (форма комочка, с отростками, кольца и т. п.). В цитоплазме взрослых паразитов виден пигмент, то разбросанный в виде мелких зерен или палочек темно-коричневого цвета, то собранный в более крупные комочки черно-бурого цвета. Паразит обычно находится в эритроците, окрашенном в розовый цвет; иногда же он свободно лежит между форменными элементами крови. ^ В градуированную центрифужную пробирку помещают 5 мл венозной крови. В нее погружают стеклянную палочку, укрепленную вертикально с помощью пробки, закрывающей пробирку. Пробирку устанавливают на водяной бане при температуре 37° С. Через 1 ч после свертывания крови палочку удаляют вместе со сгустком. 23 Определяют объем оставшейся сыворотки и выражают его в процентах Степень ретракции кровяного сгустка является пока зателем количества и состояния кровяных пластинок Снижение количества пластинок до 100 тыс в 1 мкл сопровождается уменьшением ретракции кровяного сгустка Она нарушается и при изменении функционально го состояния кровяных пластинок, например, при геморрагической тромбастении, геморрагической тромбоците мии, а также при миеломатозе и др Увеличение степени ретракции отмечается при тром боцитозе, анемии, гипофибриногенемии Определение показателя гематокрита с помощью специальной микроцентрифуги МЦГ-8 Принцип—центрифужный метод, разделение эритроцитов и плазмы достигается путем центрифугирова пия на специальной микроцентрифуге МЦГ-8 Оборудование микроцентрифуга МЦГ 8 (Львов ский завод биофизических приборов), скорость —-8000 об/мин, капиллярные трубки (имеются в комплек те с центрифугой) Могут быть использованы капилляры из набора «Антисыворотка к С-реактивному белку» Реактив—для предотвращения свертывания кро ви капилляры необходимо обработать антикоагулянтом и высушить В качестве антикоагулянта лучше приме нять гепарин (5000 МЕ/мл развести в дистиллированной воде 1 5) Ход определения Заполнить капилляры (примерно на 7/8 длины) кровью из пальца (или венозной кровью), закупорить их с одного конца герметиком (можно использовать пластилин), поместить в канавки ротора центрифуги так, чтобы закупоренные концы упирались в резиновую прокладку на периферии, закрыть крышку центрифуги, включить центрифугу, уста новив датчик времени на 5 мин По окончании центрифугирования определить гематокритный показатель с помощью отсчетной шкалы (прилагается к центрифуге) ^ Методика с применением капилляров П а н ч е и к о в а Напильником или пилочкой для ампул отрезают верхнюю часть пипетки Панченкова (на 0,5_ 24 1,0 см выше отметки «О»), прополаскивают ее раствором гепарина (содержащим 500—1000 МЕ/мл), высушивают при комнатной температуре или в термостате в наклонном положении (в срочных случаях пипетку можно не высушивать, а лишь хорошо встряхнуть для удаления капель раствора гепарина) Кровью из пальца наполняют гепаринизированный капилляр до отметки «О», затем, держа его в горизонтальном положении, стягивают резиновым кольцом, ставят в одно из гнезд центрифуги, имеющейся в лабо-' ратории (рис 7), и центрифугируют 30 мин при 2000— 3000 об/мин Относительная высота столбика эритроцитов выражает показатель гематокрита в процентах. В норме ге-матокрит у мужчин 40—48%, у женщин 36—42% Методика с применением микрокапилляров из набора «Антисыворотка к С реактивному белку». Микрокапилляры предварительно обрабатывают, как описано выше (в срочных случаях капилляр также можно лишь хорошо встряхнуть для удаления раствора гепарина). Предварительно готовят две одинаковые по весу центрифужные пробирки, на дно которых помещают, плотно упаковывая, приблизительно 3_ 4 см3 пластилина 25 Кровью Из пальца наполняют гепаринизйрованный Микрокапилляр приблизительно на 3/4 его длины или несколько больше и, держа в горизонтальном положении, втыкают его в находящийся на дне центрифужной пробирки пластилин; ставят пробирку в одно из гнезд имеющейся в лаборатории центрифуги, уравновешивая соответствующее гнездо второй пробиркой, содержащей пластилин, и центрифугируют 30 мин при 2000— 3000 об/мин. Измеряют общую высоту столбика взятой крови и высоту столбика эритроцитов и вычисляют показатель гематокрита. ^ Количество выделяемой за сутки мочи (диурез) в норме у взрослого колеблется от 1000 до 2000 мл, составляя в среднем 50—80% принятой жидкости, Окраска мочи колеблется от светло-желтой до насыщенно желтой и зависит от содержания пигментов—урохрома, уро-эретрина и др. Интенсивность окраски меняется параллельно с удельным весом и количеством выделенной мочи. Нормальная моча прозрачна. Мутность может быть вызвана солями, клеточными элементами, бактериями, жиром (липу-рия). В норме реакция мочи при смешанной пище кислая или слабокислая. Удельный вес мочи зависит от количества растворенных в ней веществ. ^ Относительную плотность мочи определяют с помощью урометра (рис. 8). Удобнее всего урометр с делениями от 1,000 до 1,050. При отсутствии такого урометра пользуются двумя урометрами—с делениями 1,000—1,030 и 1,030—1,060. Проверку показаний урометра проводят по дис тиллированной воде, которая имеет при температуре 4° С относительную плотность 1,000. Ход определения. Мочу наливают в цилиндр, избегая образования пены. Урометр осторожно погружают в жидкость так, чтобы верхняя часть его оставалась сухой. Если урометр перестает погружаться, его слегка толкают сверху, чтобы он опустился до дна цилиндра. После прекращения колебаний по нижнему мениску мочи на шкале урометра отмечают относительную плотность. Во время исследования необходимо следить за тем, чтобы урометр свободно плавал в жидкости. Для этого диаметр цилиндра должен быть больше расширенной части урометра. При измерении относительной плотности мочи нужно учитывать температуру окружающей среды, так как урометры рассчитаны на измерение относительной плотности при определенной температуре, указанной на каждом из них. На каждые 3° выше или ниже указанной на урометре температуры надо прибавлять или отнимать по 0,001, внося поправку. В норме относительная плотность мочи колеблется от 1,010 до 1,025. ^ Исследование проводится одновременно двумя видами лакмусовой бумаги (синей и красной). Результаты: 1. Синяя лакмусовая бумага краснеет, красная не изменяет своего цвета—кислая реакция. 2. Красная лакмусовая бумага синеет, синяя не изменяет цвета—щелочная реакция. 3. Оба вида бумаги не меняют цвета—нейтральная реакция. ^ Принцип. Качественная проба на белок основана на его осаждении химическими реактивами. Например, моча, содержащая белок, мутнеет при добавлении к ней сульфосалициловой кислоты. Реактив — 10% раствор сульфосалициловой кислоты; раствор должен сохраняться во флаконе из темного стекла в темном месте. При отсутствии готовой сульфосалициловой кислоты ее можно приготовить следующим 27 способом: к 26 г салициловой кислоты прибавляют 18— 20 мл концентрированной серной кислоты и постепенно нагревают до температуры 95—100° С. Образующиеся кристаллы сульфосалициловой кислоты после охлаждения разводят водой до 300 мл. Ход определения. Моча должна быть прозрачной. Мутную мочу фильтруют через бумажный фильтр. Если муть не исчезает, добавляют тальк или жженую магнезию (одну чайную ложку на 100 мл мочи), взбалтывают и фильтруют. Профильтрованную прозрачную мочу наливают в две пробирки по 4—5 мл и в одну из них добавляют 4—6 капель реактива. При положительной пробе появляется помутнение, которое четко выявляется при сравнении со второй пробиркой. Рассматривать результаты следует на темном фоне. В нормальной моче содержится незначительное количество белка, которое не определяется качественными пробами. |
Похожие:
 | Осуществление сбора мочи по Зимницкому, Нечипоренко, для общего анализа и на стерильность | | Ют утром в сухую, чистую посуду (флакон для мочи с красной крышкой). Желательно собирать мочу в тот сосуд, в котором она будет доставлена... |
| Размер железы 2,8х3,5х3 Остаточной мочи 150 мл. Содержание мочевины в сыворотке крови 7,8 ммоль/л. Общий анализ крови и мочи в норме.... | | Механизмы фильтрации. Состав первичной мочи. Особенности кровообращения в почке. Л |
| Ночное недержание мочи является «детской болезнью», хотя она может встречаться в любом возрасте. Если мокрые пеленки грудного младенца... | | Седона-метод: Избавьтесь от эмоциональных проблем и живите так, как всегда мечтали. 1 |
| Седона-метод: Избавьтесь от эмоциональных проблем и живите так, как всегда мечтали. 1 | | Седона-метод: Избавьтесь от эмоциональных проблем и живите так, как всегда мечтали. 1 |
| Общеклиническое исследование отделяемого мочеполовых органов (клеточный состав, микрофлора) | | Процесс маркетинговых исследований. Исследование рынка и исследование потенциальных возможностей фирмы |